1、技术简介

         免疫共沉淀（co-inmunoprecipitation，Co-IP）是利用抗原与抗体之间的专一性作用为基础，用于研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的经典方法。利用免疫共沉淀可以检测两个已知蛋白之间的相互作用，或者利用已知蛋白寻找与之相互作用的未知蛋白。相较于其他分子间相互作用检测方法，免疫共沉淀实验的优势在于蛋白的结合在细胞内完成，能够反应天然状态下的蛋白质相互作用，结果更加真实可靠。

2、技术原理

         当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质相互作用被保留了下来，假如细胞内存在XY蛋白复合物，用X（X也称为诱饵蛋白）的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y（Y也称为靶蛋白）也被沉淀下来。因此在细胞裂解液中加入X的抗体沉淀蛋白X，随后利用蛋白印迹（western blot，WB）检测沉淀中是否存在蛋白Y，如果存在，则说明细胞内存在XY蛋白复合物，即蛋白XY存在相互作用。

3、实验流程

         收集蛋白样品→诱饵蛋白抗体沉淀诱饵蛋白→SDS-PAGE分离蛋白→WB检测是否存在靶蛋白。

4、应用

         1. 测定两种目标蛋白质是否在体内结合；
         2. 确定一种特定蛋白质的新的作用搭档；
         3. 分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物；
         4. 应用于低丰度蛋白的富集和浓缩。