分子/互作研究

DNA-蛋白互作、RNA-蛋白互作、蛋白-蛋白互作

GST pull down

1、技术简介

         GST pull Down作为体外检测蛋白间直接互作的行之有效的方法,可用于证实预测的蛋白质-蛋白质相互作用的存在,也可用作未知的蛋白质-蛋白质相互作用的初始筛选测定法。

2、实验原理

         GST pull down实验基于GST(glutathione-S-transferase)即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白可以与谷胱甘肽(Glutathione,GSH)结合。将GSH固定于琼脂糖珠上,形成GSH-琼脂糖珠,将已知蛋白X与GST融合表达,获得的GST-X可与GSH-琼脂糖珠结合,若环境中存在与X蛋白互作的蛋白Y,则会形成“琼脂糖珠-GSH-GST-X-Y”复合物,与X蛋白互作的蛋白即可被分离并检测。

3、实验流程

4、部分结果展示